segunda-feira, 19 de setembro de 2011

Técnicas Básicas.



Aqui, veremos algumas técnicas básicas utilizadas no laboratório.
  • Esterilizaçao superficial do material vegetal: hipoclorito de sódio, hipoclorito de cálcio, cloreto de mercúrio, peróxido de hidrogênio e nitrato de prata.
A maioria dos laboratórios utilizam banho com álcool 70%, seguido de molho em soluçao de hipoclorito de sódio (1-2%), com adiçao de um gota de detergente liquído neutro. Deve-se ao fim do processo remover os restos do produto, lavando o material vegetal com água destilada e esterilizada na autoclave por 20 minutos á 120º, dentro da câmara de fluxo lâminar devidamente esterilizada.
Obs: Para conseguir o álcool 70% deve-se utilizar um aparelho chamado alcoometro ou na falta de um, misture 700ml de álcool com 300ml de água.
  • Preparo de Soluçoes Estoques: essas soluçoes serao utilizadas na preparaçao dos meios de cultura.
  1. Macronutrientes sao elementos químicos inorgânicos necessário em grandes quantidades parao crescimento da planta e sao: nitrato de cálcio, fosfato de potássio, sulfato de magnésio, sulfato de amônia, sulfato ferroso e sulfato de manganês.
  2. Micronutrientes sao elementos químicos inorgânicos necessários apenas em quantidades muito pequenas, necessário para o crescimento da planta e sao: ácido bórico, ácido molibtênico, sulfato cuprico e sulfato de zinco. Todos esses elementos devem ser dissolvidos em água destilada e deionizada e mantidos em frascos escuros dentro da geladeira, por isso recebem o nome de soluçoes estoques, para serem usados em quantidades ideais na preparaçao dos meios de cultura.
  3. Preparo de Meios de Cultura: para a prepaçao de meios é necessário  água de boa qualidade, adiçao de soluçoes de sais minerais, sacarose, vitaminas reguladores de crescimento, adiçao de agente solidificante, no caso, agar-agar e principalmente ajuste do pH.
*Reguladores de crescimento: sao os hormônios de sintetizados (auxinas, citocininas, etc...) ou naturais (água-de-côco).

*Agar-agar:  é uma substância gelatinosa derivada de certas algas vermelhas, muito usada como agente de solidificaçao.

*pH: é um símbolo que denota a concentraçao de íons de hidrogênio em uma soluçao, seus valores variam de 0 a 14.

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